【试验原理】

Ⅱ相代谢，又称结合反应，指Ⅰ相代谢产物或原型药物在酶的影响下与内源性小分子发生结合，使药物毒性、活性降低或极性增加而易于排出的反应。在药物的Ⅱ相代谢中，与葡萄糖醛酸的结合反应最为常见，由微粒体中的糖醛酸转移酶催化尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（UDPGA）进行反应，形成葡萄糖苷酸，使其水溶性增加，易于排出体外。因此，如若加入肝微粒体和UGT系统，便可重建Ⅱ相代谢体系，从而进行Ⅱ相代谢稳定性研究。

【产品说明】

本产品提供了药物Ⅱ相代谢中葡萄糖醛酸的结合反应的所有试剂，可直接用于药物Ⅱ相代谢稳定性的研究，省去了试剂配制的繁琐过程，且试剂盒各组成成分经过严格的质量检测，实验结果准确、可靠、重现性好。

根据微粒体种属的不同，可根据实际需求选择人肝微粒体、恒河猴肝微粒体、比格犬肝微粒体、大鼠肝微粒体和小鼠肝微粒体中的一种。

【产品组成】

    50反应/盒，200μL/反应。

【产品使用说明】

本产品需于-70℃冰箱冷冻保存，切记避免反复冻融。试验具体操作如下：

1、试验组：

1）冰浴融化试剂盒各组分，置于冰上待用；

2）除微粒体外，将孵育体系其它各组分按照配比混合并吹吸混匀，于37℃预孵育5min；

例：200μL孵育体系配制：

注：a.体系中有机溶剂加入量不得大于1%。

    b.若实际需要n个孵育体系，则需配置n＋1个体系。

3）将以上混合液195μL/管分装至1.5mL离心管中，于37℃水浴中保温， 5μL/反应加入肝微粒体，吹吸3次混匀于37℃水浴条件下启动代谢反应，使用秒表计时；

4）于设定孵育时间点，向孵育体系中加入200μL预冷的乙腈终止反应（预冷乙腈：孵育体系体积=1:1）。

2、对照组：

1）阳性对照组：将受试物换为阳性底物；

2）阴性对照组分三组：a.只加UDPGA；b.只加A液、B液；c.不加UDPGA、A液、B液；

3）空白对照：只包含底物和PBS缓冲液。

【运输条件】

    干冰运输。

【注意事项】

1.试验开始前，请自行准备1.5mL离心管、不同规格枪头、乙腈、37℃水浴锅等。

2.本产品仅供科研使用，不能用于人体及动物的治疗或临床诊断。

3.使用前，需于冰浴条件下解冻并混合均匀。

4.于-70℃冰箱冷冻保存，切勿反复冻融。

5.在使用过程中，也可根据实际实验需求调整各组分的加入量。

6.D-葡萄糖二酸-1.4-内酯为葡萄糖醛酸结合物的水解抑制剂，可根据实际需求选择是否加入。