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IPHASE/汇智和源 推出CYP家族重组酶及SLC家族转运体新产品

在临床应用中患者经常会同时使用多种药物,这些药物可能会产生药物-药物相互作用(Drug-drug interaction,DDI),最终导致严重不良反应或减弱治疗效果,因此,有必要对 DDI 发生的可能及其影响程度和严重性进行科学评估。药物相互作用按照发生机制可分为理化性质、代谢酶、转运体、靶点及疾病介导的相互作用,按照影响指标可分为药代动力学相互作用和药效动力学相互作用,而开展体外试验就是为了全面了解在研药物的药代动力学(Pharmacokinetics,PK)特征,以初步估计药代动力学相互作用的可能机制以及可能的严重程度,并支持 DDI 临床研究时机的确定。鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,致力于开发CYP重组酶和ABC、SLC转运体产品,助力广大客户进行人源化体外药代动力学及可能潜在的 DDI 研究。

一、重组酶CYP2A6/ CYP2D6

药物代谢发生在肝脏、小肠、肾等组织中,肝脏是代谢的主要器官,其微粒体酶活性最强,其中最重要的氧化酶因其在还原状态下可与 CO 结合,在波长 450 nm 处有一最大吸收峰,故认为是细胞色素 P450 酶。位于肝脏内质网和线粒体内膜上的 CYP450 是参与药物Ⅰ相代谢的关键酶,经酶催化的氧化反应是药物体内代谢的主要途径,参与80%~90%药物的Ⅰ相代谢。因此,可通过检测 CYP450 酶活性,了解药物的体内代谢过程,预测药物疗效和不良反应。同时,《药物相互作用指导原则2020》也指出“申请人应在首次人体试验之前开展体外代谢研究,鉴定主要代谢产物,为临床前安全性数据外推到人体提供必要的信息,并为临床研究设计提供参考。

鉴于此,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,继研发CYP2C8、CYP2C9后,再次以HEK298细胞为载体,成功构建“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase”三种重组酶。IPHASE技术人员在4℃进行重组酶制备,并通过不同底物的代谢产物生成率来验证重组酶的活性。即IPHASE技术人员调整重组酶终浓度为25pmol/ ml,并分别以终浓度为0.8uM的香豆素和终浓度为0.4uM的右美沙芬为CYP2A6+reductase+b5和CYP2D6+reductase+b5、CYP2D6+reductase的底物,在37℃下将底物和重组酶共同孵育5min,结果显示底物均有代谢,并可得到其产物生成率,表明“CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5和CYP2D6+reductase”这三种重组酶研发成功!

Recombinase

Marker Substrate Reaction

Rate

CYP2A6+reductase+b5

Coumarin

64.5 pmol/min/mg protein

CYP2D6+reductase

Dextromethorphane

122.3 pmol/min/mg protein

CYP2D6+reductase+b5

Dextromethorphane

273.9 pmol/min/mg protein


同时,为表明重组酶活性,IPHASE技术人员以相同条件,使用自研产品和竞品同时进行上述试验,结果显示IPHASE CYP2A6+reductase+b5、CYP2D6+reductase+b5及CYP2D6+reductase三种重组酶验证活性均同竞品相似或高于竞品,表明IPHASE重组酶活性较好,满足客户需求!

二、转运体OATP1B1/OATP1B3

转运体在人体全身组织中均有表达,通过影响药物的吸收、分布和消除而影响药物的药代动力学和药效学特征。根据功能可将转运体分为摄入型转运体(SLC)和外排型转运体(ABC)。OATP1B1和OATP1B3属于SLC家族,是肝细胞窦状隙膜上表达的主要摄取转运体,在多种药物的肝脏摄取中发挥重要作用。OATP1B1、OATP1B3的底物众多,很多在结构上不相关的药物也会经由其转运,因此,在体外研究其与化合物的关系至关重要!目前已明确属于OATP1B1及OATP1B3的底物、抑制剂及诱导剂如下所示:

基因符号-SLCO1B1

底物:阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、罗舒伐他汀、辛伐他汀酸、依那普利、非索非那定、甲氨蝶呤、缬沙坦、波生坦、奥美沙坦、阿曲生坦、利福平、SN-38、伊立替康、头孢托仑、瑞格列奈、西罗莫司、杀奎那韦、洛匹那韦、头孢哌酮、头孢唑林及托拉塞米;

抑制剂:环孢素、吉非贝齐、利福平、罗红霉素、泰利霉素、利托那韦、杀奎那韦、奈非那韦、西地那非、阿托伐他汀酸、辛伐他听、辛伐他汀酸、阿托伐他汀酯、洛伐他汀、洛伐他汀酸、格列本脲、贯叶金丝桃素、紫杉醇、瑞格列奈、替米沙坦、他克莫司、曲格列酮;

诱导剂:双氯芬酸、布洛芬、罗美昔布;

基因符号-SLCO1B3

底物:波生坦、地高辛、依那普利、红霉素、非索非那定、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、罗舒伐他汀、利福平、奥美沙坦、替米沙坦、阿曲生坦、缬沙坦、伊马替尼、甲氨蝶呤、紫杉醇、多烯紫杉醇、CCK-8、头孢拉定、头孢唑林、头孢美唑、头孢托仑、头孢氨苄、萘夫西林;

抑制剂:环孢素、利福平、红霉素、罗红霉素、克拉霉素、泰利霉素;

诱导剂:双氯芬酸、布洛芬、罗美昔布;

资料来源:有机阴离子转运多肽OATP1B1、OATP1B3 的基因多态性及其介导的药物相互作用研究进展

鉴于此,IPHASE继成功研发转运体MATE2-K、OAT1、OAT3和OCT2后,再次以HEK293为细胞载体,成功构建瞬时转染重组OATP1B1、OATP1B3转运体。IPHASE技术人员以终浓度为1 μM的普伐他汀钠(Deoxycholic acid, sodium salt)为底物,通过LC-MS/MS检测空载细胞HEK293和转运体细胞OATP1B1、OATP1B3细胞对普伐他汀钠的代谢能力,结果显示转运体细胞OATP1B1底物代谢量为HEK293细胞底物代谢量的13倍,OATP1B3则为34倍!均远高于《药物相互作用指导原则2020》规定的2倍,表明OATP1B1和OATP1B3转运体细胞模型构建成功!

三、IPHASE相关产品

除了最新研发的重组酶CYP2A6和转运体OATP1B1、OATP1B3细胞,IPHASE作为体外研究生物试剂引领者,相继开发出了多种重组酶及转运体细胞相关产品,助力广大客户体外研究。

分类

产品名称

规格

CYP重组酶

CYP2A6+reductase+b5

0.5mL, 0.5nmol

CYP2D6+reductase

0.5mL, 0.5nmol

CYP2D6+reductase+b5

0.5mL, 0.5nmol

CYP2C8+reductase+b5

0.5mL, 0.5nmol

CYP2C9+reductase+b5

0.5mL, 0.5nmol

UGT重组酶

UGT1A1

0.5mL,5mg/mL

UGT1A3

0.5mL,5mg/mL

UGT1A4

0.5mL,5mg/mL

UGT1A6

0.5mL,5mg/mL

UGT1A9

0.5mL,5mg/mL

UGT1A10

0.5mL,5mg/mL

UGT2B17

0.5mL,5mg/mL

转运体细胞

OATP1B1细胞

8-10 million cells

OATP1B3细胞

8-10 million cells

OAT1细胞

8-10 million cells

OAT3细胞

8-10 million cells

OCT2细胞

8-10 million cells

MATE2-K细胞

8-10 million cells


IPHASE/汇智和源凭借多年的研发经验,推出了多领域、多种类的高端科研试剂,为药物早期研发提供筛选工具,为生命科学领域的探索提供新材料、新方法和新手段,为食品、药品、化学品等的遗传毒性研究提供便捷产品,望广大科研工作者来电咨询,咨询热线400-127-6686。

发    文    章    得    奖    励

凡使用本公司产品,在国内及国际刊物上发表论文(论文发表日起一年内),并注明产品属于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 汇智和源生物技术(苏州)有限公司所有,即可申请奖励。根据发表刊物影响因子不同,给予不同金额奖品:

非SCI论文及IF≤5分,500元礼品;

5分<IF≤8分 800元;

8分<IF≤10分 1000元;

IF≥10分 2000元;

注:礼品卡也可兑换同等金额产品购买抵用券;

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关    于    我    们

汇智和源,致力于为创新药研发企业及生命科学研究机构提供高品质的生物试剂,IPHASE为公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。